플라스미드 추출
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작성일 19-06-12 15:02
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(12)…(drop)
다. 단백질이 없는 벗겨진 핵산이며 DNA가 이중가닥을 한 원형의 분자이며 세균 염색체와는 별도로 존재한다.
(3) Voltex로 두 액체를 잘 섞어준다.
(8) X를 10분 동안 13000rpm 원심분리 해준다.
(7) Inverting을 해준다.
(6) N3 350μL를 마이크로피펫으로 X에 투하한다.
(5) Inverting(가볍게 위아래로 5~6번 흔드는 행위)을 해준다.
대장균
무성생식으로 번식하지만 성선모라고 하는 부속물을 통해 유전물질을 교환가능하다. 사람의 소화관에 서식하고 있따 플라스미드를 가지고 있으며 이로 인해 다른 종의 유전자를 받아드릴 수 있따
4. 재료: P1용액, P2용액, N3용액, PB용액, PE용액, EB용액, 파란튜브, 빈 튜브2개, 대장균
원심분리기, 볼텍스, 6x용액, 마이크로피펫, 팁, 젤, 전기영동장치
5. experiment(실험)순서
(1) 대장균이 들어있는 액체를 준비한다. 플라스미드는 숙주세포의 기구를 이용하여 에너지, 원료물질을 복사하기에 숙주세포가 반드시 필요하다.레포트/공학기술
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1. 플라스미드 추출
2. 대장균으로부터 플라스미드를 추출하여 전기영동을 한다. (겹쳐진 튜브를 Y라 하자)
(11) 아래쪽 튜브에 고인 액체를 버린다. `볼텍스` `원심분리장치`
(9) 아래쪽에 뭉친 덩어리를 건드리지 않고 표면 쪽의 액체만 500~600μL정도 마이크로피펫으로 뽑아내 2개가 겹쳐진 튜브에 투하한다.
3. 理論
플라스미드
플라스미드는 자연적으로 존재하는 원형의 DNA이며 보조염색체로써 작용한다.
(4) P2 250μL를 마이크로피펫으로 X에 투하한다.(액체를 뽑아낼 때 튜브를 살짝 기울인다.)
(10) Y를 1분 동안 13000rpm 원심분리 해준다. (대장균이 들어있는 액체를 X라 하자.)
(2) P1 250μL를 마이크로피펫으로 X에 투하한다.
